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在選擇大鼠ELISA試劑盒時(shí),需要考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵因素

瀏覽次數(shù):101發(fā)布日期:2025-01-10
  大鼠ELISA試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的實(shí)驗(yàn)工具,它通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)來(lái)檢測(cè)和定量分析大鼠體內(nèi)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。
 
  大鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。具體步驟如下:
 
  1.包被:將特異性抗體(如大鼠白細(xì)胞介素1β捕獲抗體)預(yù)先包被在微孔板中。
 
  2.加入樣本和標(biāo)準(zhǔn)品:依次加入待測(cè)樣本、標(biāo)準(zhǔn)品以及HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體。
 
  3.溫育與洗滌:經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的溫育后,洗滌以去除未結(jié)合的成分。
 
  4.顯色反應(yīng):加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺),TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中的特定蛋白質(zhì)含量呈正相關(guān)。
 
  5.讀數(shù)與分析:用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。
 
  在選擇大鼠ELISA試劑盒時(shí),需要考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵因素:
 
  1.蛋白濃度:通過(guò)NCBI、uniprot等數(shù)據(jù)庫(kù)查找待測(cè)樣本的蛋白表達(dá)量參考值,與試劑盒中給出的樣本值進(jìn)行比較。
 
  2.應(yīng)用種屬與檢測(cè)樣本種類:確保試劑盒適用于大鼠樣本,并注意不同抗凝劑處理的血清和血漿、細(xì)胞上清及細(xì)胞裂解液等樣本類型的適用性。
 
  3.檢測(cè)范圍與稀釋線性:選擇具有合適檢測(cè)范圍和良好稀釋線性的試劑盒,以確保待測(cè)樣本濃度落在標(biāo)曲范圍內(nèi)。
 
  4.靈敏度與變異系數(shù):高靈敏度的試劑盒適用于低濃度樣本的檢測(cè);板間和板內(nèi)變異系數(shù)(CV%)應(yīng)小于10%。
 
  5.有效期:考慮試劑盒的有效期,確保在有效期內(nèi)使用。
大鼠ELISA試劑盒
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